Fondazione Tettamanti

Le prestazioni

Le attività diagnostiche effettuate presso il Laboratorio sono comprese nell’ambito delle seguenti specializzazioni, secondo quanto previsto dalla D.G.R. 20 Luglio 2001 - N7/5640:

 

Esami di Citomorfologia/Immunologia: 

  • Esame emocromocitometrico
  • Esame del midollo osseo per apposizione e/o striscio
  • Tipizzazione di sottopopolazioni leucocitarie
  • Esame del liquido cefalo-rachidiano
  • Test clonogenico (coltura cellulare)
  • Analisi dell’attivita’ citotossica delle cellule NK
  • Test di proliferazione cellulare

 Esami di Citogenetica: 

  • Analisi Citogenetica convenzionale e molecolare (FISH) su cellule in sospensione (Midollo Osseo e Sangue Periferico)
  • Analisi Citogenetica per patologia da fragilità cromosomica con agente clastogenico in vitro

 Esami di Biologia Molecolare: 

  • Analisi molecolare delle traslocazioni cromosomiche: t(9;22); t(4;11); t(1;19); t(12;21); t(8;21); t(15;17); inv(16)
  • Analisi molecolare delle mutazioni del gene FLT3, NPM1, JAK2, c-KIT, CEBPa
  • Analisi dell’overespressione del gene WT1
  • Analisi molecolare quantitativa del gene di fusione BCR-ABL
  • Analisi molecolare della Malattia Residua Minima
  • Analisi molecolare del chimerismo post TMO
  • Analisi molecolare della clonalità linfoide
  • Analisi molecolare dei polimorfismi del gene TPMT
  • Analisi genomica tramite SNP arrays

 

 

ELENCO DELLE PRESTAZIONI SUDDIVISE PER PATOLOGIA

 

Per i pazienti pediatrici in cura presso U.O. Pediatria, Fondazione MBBM:

Sui campioni di Sangue Periferico (PB) e di Midollo Osseo (BM)  vengono eseguite le seguenti analisi:

  • Esame Emocromocitometrico
  • Esame Morfologico
  • Analisi Citochimica
  • Immunofenotipo

 

Sui campioni di Liquido Cefalo-rachidiano (Liquor) e liquidi biologici vengono eseguite le seguenti analisi:

  • Conta cellulare
  • Esame morfologico
  • Analisi Citochimica
  • Immunofenotipo

 

 

 

Per pazienti pediatrici ed adulti:

 1.    LEUCEMIE LINFOBLASTICHE ACUTE (LLA)

 

  • Analisi CITOGENETICA classica

 

                           Pazienti: Pediatrici, Adulti

                           Materiale: BM, PB (in presenza di blasti)

                           Quando: Esordio e follow up

 

  • Analisi FISH per la ricerca di:

- Riarrangiamenti gene MLL

               - t(9;22)

 

                           Pazienti: Pediatrici, Adulti

                           Materiale: BM, PB (in presenza di blasti)

                           Quando: Esordio e follow up se l’esordio risulta positivo

 

  • Analisi di BIOLOGIA MOLECOLARE (PCR qualitativa) per :

 

- t(9;22) (Pz. Pediatrici e adulti)

- t(4;11) (Pz. Pediatrici, adulti)

- t(1;19) (Pz. Pediatrici, adulti)

- t(12;21) (Pz. Pediatrici)

 

Oltre ai pazienti pediatrici della Fondazione MBBM vengono analizzati tutti i pz pediatrici italiani inseriti nel protocollo AIEOP LAL2000

                                   

Quando: esordio e follow up se l’esordio risulta positivo

Materiale: BM, PB (in presenza di blasti)

- Analisi di Clonalita’ Linfoide

 

 Pazienti: Pediatrici, Adulti

 Materiale: BM, PB (se in presenza di blasti), tessuto in paraffina

 Quando: esordio e follow up

 

  • Analisi di BIOLOGIA MOLECOLARE per la valutazione della Malattia Residua Minima (MRM) (PCR quantitativa su DNA genomico)

 

Pazienti: Pediatrici

Oltre ai pazienti pediatrici della Fondazione MBBM vengono analizzati tutti i pz pediatrici italiani inseriti nel protocollo AIEOP LAL2000

Materiale: BM

Quando: all’esordio determinazione della clonalita’ linfoide,(anche su PB con blasti) e nei giorni +33/+78 valutazione della MRM.

 

  • Analisi di BIOLOGIA MOLECOLARE per la valutazione della Malattia Residua Minima (MRM) (PCR quantitativa su RNA) per:

                          

              - t(9;22)

 

              Pazienti: Pediatrici e Adulti

              Materiale: BM; PB

              Quando: esordio e follow up

 

  • Analisi di BIOLOGIA MOLECOLARE per la valutazione dei polimorfismi del gene TPMT (tramite analisi di “melting curve genotyping”):

 

Pazienti: Pediatrici

               Materiale: BM; PB

               Quando: esordio

 

 

 2.    LEUCEMIE MIELOIDI ACUTE (LMA)

 

  • Analisi CITOGENETICA classica

 

                           Pazienti: Pediatrici, Adulti

                           Materiale: BM, PB (in presenza di blasti)

                           Quando: Esordio e recidive

 

  • Analisi FISH per la ricerca di:

 

-              t(15;17)

-              inv(16)

-              t(8;21)

 

                                    Pazienti: Pediatrici, Adulti

                           Materiale: BM, PB (in presenza di blasti)

                                    Quando: Esordio e follow up se l’esordio risulta positivo

 

 

  • Analisi di BIOLOGIA MOLECOLARE (PCR qualitativa) per :

 

-              t(8;21)

-              inv(16)

-              t(15;17) con sospetto di Leucemia Promielocitica Acuta

-              Ricerca di mutazioni del gene FLT3 (ITD e D835)

-              Ricerca di mutazioni del gene NPM1

-              Ricerca di mutazioni del gene CEBPa

-              Valutazione dell’overespressione del gene WT1

 

 

                                    Pazienti: Pediatrici, Adulti

                           Materiale: BM, PB (in presenza di blasti)

                                    Quando: Esordio e follow up se l’esordio risulta positivo

 

 3.    LEUCEMIE LINFOCITICHE CRONICHE (LLC)

 

  • Analisi FISH per la ricerca di:

 

-  Trisomia cromosoma 12

-  Delezione gene p53 (cromosoma 17p13)

-  Delezione cromosoma 11q22/ATM

-  Delezione cromosoma 13q14

 

Quando: esordio e follow up se esordio negativo

Pazienti: Adulti

Materiale: BM, PB

 

 4.    LEUCEMIE MIELOIDI CRONICHE (LMC)

 

  • Analisi CITOGENETICA classica
  • Analisi FISH per la ricerca di:

 

- t(9;22)

 

Pazienti: Pediatrici, Adulti

Materiale: BM, PB (in presenza di blasti)

Quando: Esordio e follow up

 

 

  • Analisi di BIOLOGIA MOLECOLARE (PCR qualitativa) per :

 

- t(9;22)

 

Pazienti: Pediatrici, Adulti

Materiale: BM, PB (in presenza di blasti)

Quando: Esordio e follow up se l’esordio risulta positivo

 

  • Analisi di BIOLOGIA MOLECOLARE per la valutazione della Malattia Residua Minima (MRM) (PCR quantitativa su RNA) per :

 

-  t(9;22)

 

Pazienti: Pediatrici, Adulti

Materiale: BM

Quando: Follow up

 

 

 5.    MIELOMI MULTIPLI (MM)

 

  • Analisi FISH su celluleCD138+ per la ricerca di:

 

- Delezione cromosoma 13q14

- Delezione gene p53 (cromosoma 17p13)

- Traslocazione t(4;14)

 

 

Pazienti: Adulti

Materiale: BM (se plasmacellule ≥ 20%), plasmacellule CD138+

Quando: Esordio 

 

 

 6.    LEUCEMIE MIELOMONOCITICHE CRONICHE (LMMC)

 

  • Analisi CITOGENETICA classica

 

  • Analisi FISH per la ricerca di:

-  Riarrangiamenti gene PDGFRβ (cromosoma 5q32)

-  Riarrangiamenti gene PDGFRα (cromosoma 4q12)

 

Pazienti: Adulti

Materiale: BM

Quando: Esordio

 

  • Analisi di BIOLOGIA MOLECOLARE per :

 

- Mutazione gene cKIT 

 

 7.    SINDROMI MIELOPROLIFERATIVE CRONICHE (SMP)

 

  • Analisi CITOGENETICA classica
  • Analisi FISH per la ricerca di:

- Riarrangiamenti gene PDGFRβ (cromosoma 5q32)

- Fusione FIP1L1-PDGFRα (delezione cromosoma 4q12) (sindromi ipereosinofile primitive)

 

Pazienti: Adulti

Materiale: BM

Quando: Esordio

 

  • Analisi di BIOLOGIA MOLECOLARE (PCR qualitativa) per :

 

-  t(9;22)

-  Gene di fusione FIP1L1-PDGFRα

-  Mutazione gene JAK2 V617F

-  Mutazione gene JAK2  esone 12  (PV V617F negative)

-  Mutazione gene cKIT

 

Pazienti: Adulti

Materiale: BM

Quando: Esordio

 

 8.    MIELODISPLASIE (MDS)

 

  • Analisi FISH per la ricerca di:

- Monosomia/Delezione cromosoma 7q22/7q31

- Trisomia cromosoma 8

- Monosomia/Delezione cromosoma 5/5q31

                          

Pazienti: Pediatrici, Adulti

Materiale: BM

Quando: Esordio e follow up 

 

 9.    ANEMIA DI FANCONI (AF)

 

Analisi delle frequenze di rottura cromosomica con agente clastogenico (DEB) in vitro su sangue periferico stimolato con PHA.

 

Pazienti: Pediatrici, Adulti

Materiale: PB

Quando: su sospetto clinico 

 

 10.ANALISI POST- TRAPIANTO DI MIDOLLO OSSEO

 

  • Analisi citogenetica del chimerismo post-trapianto “sex mismatch” con analisi FISH per i cromosomi X e Y.
  • Analisi molecolare del chimerismo post-trapianto mediante analisi di marcatori STR.

 

                           Pazienti: Pediatrici, Adulti

                           Materiale: BM

                           Quando: follow up

 

 

Schema riassuntivo delle prestazioni:

 

Patologia

Analisi

Pazienti

Materiale

Ricerca di

Quando

LLA

CITOGENETICA

Ped, Ad

BM, PB (con blasti)

Screening cariotipo

Esordio

Follow up

FISH

Ped, Ad

BM, PB (con blasti)

Riarrangiam. MLL  

t(9;22)

Esordio

Follow up (se es. pos)

BIOLOGIA MOLECOLARE (PCR qualitativa)

Ped, Ad

BM, PB (con blasti)

t(9;22)

t(4;11)

t(1;19)

Esordio

Follow up (se es. pos)

 

Ped.

BM, PB (con blasti)

t(12;21)

Esordio

Follow up (se es. pos)

 

Ped, Ad

BM, PB (con blasti), tessuto in paraffina

Analisi clonalita’ linfoide

Esordio

Follow up

Valutazione della MALATTIA RESIDUA MINIMA (riarrangiam. Ig/TcR) (PCR quantitativa)

Ped, Ad

BM

Analisi clonalita’ linfoide all’esordio-valutazione MRM gg +15, +33, +78

Esordio

Follow up

Valutazione della MALATTIA RESIDUA MINIMA (PCR quantitativa)

Ped, Ad

BM, PB (con blasti)

t(9;22)

Esordio

Follow up

LMA

CITOGENETICA

Ped, Ad

BM, PB (con blasti)

Screening cariotipo

Esordio

Recidive

FISH

Ped, Ad

BM, PB (con blasti)

t(15;17)

inv(16)

t(8;21)

Esordio

Follow up (se es. pos)

BIOLOGIA MOLECOLARE (PCR qualitativa)

Ped, Ad

BM, PB (con blasti)

t(15;17)

inv(16)

t(8;21)

FLT3-ITD

FLT3-D835

Mut. NPM1

Esordio

Follow up (se es. pos)

LLC

FISH

Ad

BM, PB (con blasti)

+12

del(17p13)/p53

del(11q22)/ATM

del(13q14)

Esordio

Follow up (se es. pos)

 

 

 

 

 

 

 

 

Patologia

Analisi

Pazienti

Materiale

Ricerca di

Quando

LMC

CITOGENETICA

Ped, Ad

BM, PB (con blasti)

Screening cariotipo

Esordio

Follow up

FISH

Ped, Ad

BM, PB (con blasti)

t(9;22)

Esordio

Follow up (se es. pos)

BIOLOGIA MOLECOLARE (PCR qualitativa)

Ped, Ad

BM, PB (con blasti)

t(9;22)

 

Esordio

Follow up (se es. pos)

Valutazione della MALATTIA RESIDUA MINIMA (PCR quantitativa)

Ped, Ad

BM, PB (con blasti)

t(9;22)

Esordio

Follow up

MM

FISH

Ad

BM

del(13q14)

del(17p13)/p53

 

 

Esordio

Follow up (se es. pos)

LMMC

CITOGENETICA

Ad

BM

Screening cariotipo

Esordio

Follow up

FISH

Ad

BM

- del(5q32)/PDGFRβ

- del(4q12)/ PDGFRα

 

 

Esordio

 

SMP

CITOGENETICA

Ad

BM

Screening cariotipo

Esordio

Follow up

FISH

Ad

BM

- del(5q32)/PDGFRβ

- del(4q12)/ PDGFRα

 

 

Esordio

 

BIOLOGIA MOLECOLARE (PCR qualitativa)

Ad

BM, PB (con blasti)

- t(9;22)

- FIP1L1-PDGFRα (sindr.ipereos.)

- mut. JAK2

- mut. cKIT

 

Esordio

 

MDS

FISH

Ped, Ad

BM

- monosomia/del 7-7q31

- trisomia 8

- monosomia/del 5-5q31

 

 

Esordio

Follow up

CENTRO DI RICERCA
TETTAMANTI
La Fondazione tettamanti ha creato il Centro di Ricerca Matilde Tettamanti per promuovere lo studio delle leucemie ed emopatie infantili.